介绍
从全球的角度来看，猪肺炎支原体感染对下游生产带来的动物福利问题和经济损失促使我们对猪群的病原进行控制与净化。封群、药物和疫苗是北美进行猪肺炎支原体净化的通用手法。封群中最重要的一步是确定封群的第0天。封群第0天是指猪肺炎支原体暴露给后备母猪后，最后一头后备母猪入群的时间，这也是封群的开始。但是，没有很好的诊断流程可以确认成功暴露的第0天。因此，本研究的目的是研究样本收集方法以确定整个猪群暴露猪肺炎支原体（采用两种常用的后备母猪暴露方法）。
方法
40头21-56日龄的后备母猪，均打上耳牌以便在5个后备培育单元纵向采样，这些后备母猪通过猪肺炎支原体自然接触暴露或者气溶胶暴露。
本研究所用后备母猪均来自重要病原阴性的猪场（包括猪肺炎支原体阴性），在确定阴性暴露前及每两周采集后备母猪样品。
采集血样检测抗体，采集喉部、深部气管及口腔唾液样品进行PCR检测核酸，一直采样直到85%以上的样品PCR为阳性。制定采样方案以确定暴露后的猪肺炎支原体感染。
利用检测方案中有限群体的Freecalc样本量大小和指定切点数正算法函数在RStudio中进行计算。对Freecalc算法进行了改进：非感染动物是我们主要关注的动物，因为我们的目的就是确定样本量大小才能得到猪群（非感染后备母猪的比例在给定值之上的猪群）高检测出率。
结果与讨论
结果表明不同样本类型猪肺炎支原体的检出率不同。其它样本类型检测阳性的样本中，口腔唾液在后备母猪猪群中检出率最低，深部气管分泌物样本PCR的检出率高于喉部分泌物样本。猪肺炎支原体抗体转阳及口腔唾液PCR阳性结果要滞后于个体猪只的PCR结果。
在气溶胶暴露的3个后备母猪培育单元通过深部气管分泌物检测在暴露后2周85%以上后备母猪PCR检测阳性。自然接触暴露后备母猪2周之后深部气管分泌物阳性率为22.5%、四周后为61.5%、6周后100%。
针对最早期的监测，与其它样品类型相比，深部气管分泌物样品类型要求最少的采样量。其中有一个采用气溶胶暴露失败的后备母猪培育单元，如此我们可以对暴露流程进行早期干预并延后封群的第0天，以便净化流程的精确化。本研究提出的采样建议可以用于后备母猪暴露后猪肺炎支原体的感染确定，也即封群第0天的确定。
