体细胞克隆是通过体细胞进行无性繁殖的一项生物技术。自1997年在绵羊克隆领域取得突破性进展后，该技术已相继在多种哺乳动物中实现应用。尤其在猪育种领域，国内外已有多起应用案例［1-2］。
在养猪生产中，体细胞克隆作为无性繁殖技术展现出显著优势：其基因稳定性高，可实现相同基因型个体的无限繁殖。这一特性可有效突破传统种猪繁育的技术瓶颈——传统繁育中精子与卵子结合时基因重组具有高度随机性，导致后代育种指数不可控、优秀种猪占比不高等系列问题。因此，近年来，多家种猪育种公司在种猪繁育中尝试应用了该技术。本文通过华东某种猪育种公司核心育种场（以下简称“育种场”）的一例种猪克隆案例，简要介绍了该技术当前的应用情况以及对种猪繁育的意义。近3年来该育种场已连续进行了多批次的种猪体细胞克隆，本文选取2024年进行的一个批次的克隆案例，并对该案例进行了分析。
1、克隆过程简述
1.1体细胞供体种猪选取及组织样本采集
2024年5月，育种场从核心群中选取高遗传指数杜洛克公猪1头，无菌采集其耳组织样本，用于构建制作克隆专用体细胞系。
1.2核移植与融合
运用显微操作技术，提取供体种猪组织细胞的细胞核，并将其注入去核后的卵母细胞中，使细胞核与卵母细胞融合，形成具有完整遗传信息的重组胚胎。
1.3胚胎激活与培养
重组胚胎激活后，进入胚胎培养阶段。此过程中，对胚胎进行基因同源性和病原体检测，以防止细胞系受到污染。
1.4代孕母猪的筛选和胚胎移植
2024年8月，从同期断奶的种母猪群中，选择9头经多种病原体检测呈阴性的健康猪作为代孕母猪，其中长白母猪6头，大白母猪3头。8月7日，将克隆胚胎移植到代孕母猪子宫中（图1）。
在养猪生产中，体细胞克隆作为无性繁殖技术展现出显著优势：其基因稳定性高，可实现相同基因型个体的无限繁殖。这一特性可有效突破传统种猪繁育的技术瓶颈——传统繁育中精子与卵子结合时基因重组具有高度随机性，导致后代育种指数不可控、优秀种猪占比不高等系列问题。因此，近年来，多家种猪育种公司在种猪繁育中尝试应用了该技术。本文通过华东某种猪育种公司核心育种场（以下简称“育种场”）的一例种猪克隆案例，简要介绍了该技术当前的应用情况以及对种猪繁育的意义。近3年来该育种场已连续进行了多批次的种猪体细胞克隆，本文选取2024年进行的一个批次的克隆案例，并对该案例进行了分析。
1、克隆过程简述
1.1体细胞供体种猪选取及组织样本采集
2024年5月，育种场从核心群中选取高遗传指数杜洛克公猪1头，无菌采集其耳组织样本，用于构建制作克隆专用体细胞系。
1.2核移植与融合
运用显微操作技术，提取供体种猪组织细胞的细胞核，并将其注入去核后的卵母细胞中，使细胞核与卵母细胞融合，形成具有完整遗传信息的重组胚胎。
1.3胚胎激活与培养
重组胚胎激活后，进入胚胎培养阶段。此过程中，对胚胎进行基因同源性和病原体检测，以防止细胞系受到污染。
1.4代孕母猪的筛选和胚胎移植
2024年8月，从同期断奶的种母猪群中，选择9头经多种病原体检测呈阴性的健康猪作为代孕母猪，其中长白母猪6头，大白母猪3头。8月7日，将克隆胚胎移植到代孕母猪子宫中（图1）。
图1克隆胚胎移植及妊娠分娩
1.5代孕母猪妊娠管理
代孕母猪完成胚胎移植后，按照正常的营养和健康需求对其进行妊娠期管理。在妊娠初期，对胚胎移植后的母猪进行消毒、抗炎处理。
1.6代孕母猪妊检和分娩
胚胎移植后的第35天，采用B超技术对代孕母猪进行妊娠检测；在受孕115d与116d，两头代孕母猪分娩（图1）。
表1列出了克隆过程的相关数据记录。
从表1可知，同一头杜洛克种公猪供体的克隆胚胎，移植至6头长白母猪、3头大白母猪体内后发现，7头母猪空怀，2头母猪怀孕；成功怀孕的两头长白母猪分别在受孕115d和116d分娩，其怀孕同期较群体正常怀孕时间分别延后了1d和2d；两窝产仔数分别为4头和5头，9头仔猪均发育良好，无死胎、木乃伊胎和弱仔。（注：12月1日出生的1头克隆仔猪在12月2日被母猪压死，两头代孕母猪在仔猪23日龄断奶后的第4天，均正常发情并完成配种。）
2、克隆猪生长性能
克隆猪出生后，按照育种场常规饲养管理流程进行生产性能和育种指标的测定，截至2025年4月，已完成多批次生长性能的测定，测定结果见表2。
从表2可见，克隆猪具有较快的生长速度。供体杜洛克种猪体重达100kg时的年龄为127.48d。8头克隆猪在122.5日龄时平均体重为97.25kg，校正到体重为100kg时的平均年龄为125.12d；其中生长速度较快的两头克隆猪体重达到100kg，比供体种猪的时间分别提前了7d和8d。生长性能对比结果：克隆猪与供体种猪的生长性能指标基本保持一致；但克隆猪个体间存在一定差异，其中初生重差异最大达0.9kg，生长至100kg体重的年龄差异最大达13d。经分析初步推断，该差异可能与供体卵母细胞的质量、母猪胎盘效率、妊娠后期饲养管理等因素有关。
8头克隆猪来自两头长白母猪，按代孕母猪分组，两组克隆猪在生长性能方面没有明显差异。
3、克隆猪投入产出分析
从细胞系制作、胚胎移植到出生后饲养至体重100kg，经核算每头克隆猪的培育投入约2万元。在常规育种场，采用常规繁育手段使母猪怀孕、产仔，并将仔猪饲养至体重100kg，每头常规种猪的培育成本约为2000元。仅从培育成本看，克隆猪培育成本约为普通种猪的10倍。但值得注意的是，克隆猪的供体细胞均来自群体中育种指数前1%种猪。若采用常规繁育手段，培育1头同等育种性能的种猪，需要从100头常规种猪中筛选（100头×2000元），总成本约20万元。因此，从规模化生产高育种指数生产性能的种猪角度来看，克隆技术在优良种猪的投入产出比上显著优于常规繁育模式。
4、应用分析及前景展望
从克隆猪的生长性能测定数据及体细胞克隆猪与常规繁育猪投入产出比来看，体细胞克隆是一种精准、高效、经济的高性能种猪繁育推广模式，打破了传统繁育体系种群层次结构及世代间隔的局限。体细胞克隆可以使优良种猪在单个繁殖周期内得到数量级扩繁，从而极大提升繁育体系中优良基因的传递速度和效率。
猪的世代间隔一般为1.5年，在常规繁育体系下，一头优秀种猪的后代要从核心群流动到扩繁群需要1.5年，再从扩繁群流动到商品群又需要1.5年，繁育体系总体的基因传递速度约3年一次，基因的传递更新效率较低。而体细胞克隆技术可以跨越常规扩繁所需的世代间隔。在基因组早期选择技术支撑下，可以在优良种猪出生后1周内采集机体组织样本制作细胞系，在两个月内完成体细胞克隆与胚胎移植，并在供体猪约6月龄时分娩产出克隆猪，从而实现一头优良种猪与自己的克隆个体只相差6个月的高效跨世代基因传递。
该技术可以使一头优良种猪的终生基因传递数量从不足100头提升到1000头乃至更多头，繁育效率提高超10倍，极大地提升了优良种猪的扩繁应用速度，实现产业链终端与育种核心群优良基因种猪的时差不超过6个月。另外，体细胞系在低温条件下可长期稳定保存，为避免猪种质资源的流失提供安全备份。随着部分国家已批准在种猪繁育上使用特定基因编辑技术，体细胞克隆与基因编辑技术的结合，将有更广阔的应用前景。
